关注公众号
了解更多
通过代谢酶抑制试验评价供试品对CYP450、UGT、SULT或CES等主要亚酶的抑制作用，了解其直接抑制或时间依赖性抑制（TDI）作用情况，从而评价其可能的代谢性相互作用。
孵育体系 | 细胞组分：肝细胞 亚细胞组分：肝、肠、肺或肾等组织的微粒体、S9或匀浆等 基因重组酶体系 |
种属 | 人 |
测试酶系 | CYP450酶：CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A等 UGT酶：UGT1A1、1A3、1A4、1A6、1A9、2B7和2B15等 SULT酶：SULT1A1、1A2、1A3、1B1、1E1和2A1等 CES酶：CES1和CES2 其他：AADAC、FMO等其他酶或亚型可应要求提供 |
供试品测试浓度 | 5~7个，根据已知的药效和毒性数据设计 |
探针底物浓度 | 1个或1-5个（直接抑制常数测定），根据探针底物Km值设计 |
孵育体系蛋白浓度 | 亚细胞组分：0.1-1 mg/mL（可根据要求提供不同的浓度） 细胞组分：0.1-2×106 cells/mL 基因重组酶体系：250 - 500 pmol/mL 或0.1-1 mg/mL |
孵育时间 | 直接抑制或TDI IC50 shift：一个预孵育时间点，一个孵育时间点 TDI KI和Kinact测定：预孵育2-5个时间点，一个正式孵育时间点 根据不同要求提供 |
辅酶因子 | NADPH或UDPGA（其他辅酶因子可根据要求提供） |
分析方法 | LC-MS/MS |
数据呈现 | 探针底物代谢产物相对生成量 相对活性（% of NC） 半数抑制浓度（IC50） 抑制活性（%） IC50偏移 抑制常数（Ki） 最大失活速率常数（Kinact） 导致半数最大失活的游离抑制剂浓度（KI） |
客服1